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1.
Targeted editing of intronic-splicing silencer enhancement of SMN2 Exon 7 inclusion by CRISPR/Case 9
LIUCHENG WU YI WANG LILI DU GUIQING JI RUI ZHOU ZEYI ZHAO JUN CHEN SHUNXING ZHU 《Biocell》2021,45(6):1501-1507
Spinal muscular atrophy (SMA) is an autosomal recessive hereditary neuromuscular disease. Exon 7 and 8 of survival of motor neuron 1 (SMN1) gene or only exon 7 homology deletion leads to the failure to produce a full-length SMN gene. The copy number of SMN2 gene with high homology of SMN1 affects the degree of disease and was the target gene for targeting therapy, in which splicing silencer in intron 7 was the key to suppress the inclusion of exon 7. In this study, we projected to use CRISPR/Case 9 for the targeted editing of intronic-splicing silencer (ISS) sequence to promote the inclusion of SMN2 exon 7 and increase the production of SMN2 full-length (FL) gene expression. It happens that there was a protospacer adjacent motif (PAM) at one end of the ISS sequence according to the design of sgRNA. The recombinant vector of sgRNA HSMN2 CRISPR/Case 9 was constructed and transfected into HEK293 cells. Sequencing results showed that the ISS sequence could be edited accurately and targeting in the predicted direction, in which deleting small fragments, inserting small amounts and mutation. Quantitative analysis of RT-PCR products by restriction enzyme of DdeI digestion showed that the FL of SMN2 increased by 8% (P < 0.05). In the primary cultured chondrocytes of SMA mice, in which sgRNA HSMN2 CRISPR/Case9 recombinant vector transfection could increase the SMN2 FL gene by 23% (P < 0.05) and significantly improve SMN protein levels (P < 0.05). CRISPR/Case 9 is an effective tool for gene editing and therapy of hereditary diseases, but it is rarely reported in the treatment of SMA diseases. This study shows that CRISPR/Case 9 was first used for the precision target of ISS sequence editing, which can effectively promote the production of SMN2 FL gene expressions, in which there was an important clinical reference value. 相似文献
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为改进模型对高寒地区融雪径流模拟不足的缺陷,将融雪模块耦合到传统 abcd 模型。利用 1980—2018 年
逐月实测的径流数据和通过 AnuSpline 方法插值的格网气象要素,驱动改进后的abcd 模型,分析三江源生态保护
措施实施前后(1980—1999 年和 2000—2018 年)黄河源区径流的动态变化,并量化关键气象因素与人类活动对
径流变化的影响程度,即相对贡献。结果表明:耦合融雪模块的 abcd-snow 模型完善了高寒地区水文过程的模拟,
提高对径流的模拟性能,在黄河源区表现出较好的适用性;整个研究时段黄河源区的实测径流呈不显著减少趋势
(?0.80?mm/a,p>0.05),但 2000 年前径流则呈现显著下降趋势(?4.12?mm/a,p<0.05),2000 年后径流则呈显著增加
趋势(3.16?mm/a,p<0.05);?归因分析表明气候变化是源区径流变化的主导因素。2000 年前,气候变化对径流减少
的相对贡献率为 62.8%,人类活动对径流的贡献为 37.2%;2000 年后,气候变化对径流增加的贡献率达到 120.0?%,
人类活动对径流的贡献为?20.0%。其中:降水的变化是决定径流变化主导因素;其他气候因素的相对贡献较小;
以人类活动为主的生态恢复可显著降低河川径流。本研究有助于理解气候变化和下垫面变化对黄河源区水资源
变化的系统驱动机理,并为流域水资源合理配置提供科学参考依据。 相似文献
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9.
Mn4+激活红光荧光粉是白光半导体发光二极管(wLEDs)领域当前研究热点之一。Mn4+离子2E→4A2跃迁在铝酸盐中的最短发光波长是在MgAl2O4中实现的651 nm发光, 由于其结构中含有形成四面体或八面体配位的两种阳离子格位(Mg2+/Al3+), 易造成所掺杂锰元素存在多种价态(+2/+4/+3等)。本研究通过改变起始原料中Al2O3的晶型(γ/α比例)及退火处理来调控锰离子在MgAl2O4晶格中的占据格位, 对其主要存在价态实现调控。采用荧光光谱和紫外-可见-近红外漫反射光谱技术来表征所合成荧光粉中Mn离子的价态及其演变。研究发现, 高α/(α+γ)比铝源促进Mn2+形成, 而低α/(α+γ)比铝源促进Mn4+形成。通过使用高活性纳米γ-Al2O3为铝源, 有效抑制了锰离子在MgAl2O4中Mg2+格位的占据及Mn2+离子的形成, 经空气中1550 ℃保温5 h的一次高温热处理即可制备出在可见光区只有Mn4+红光发光的高纯高亮度MgAl2O4:Mn4+荧光粉。氧化铝晶型影响锰离子掺杂格位和掺杂价态的本质规律是: 氧化铝活性决定实际固溶掺杂反应步骤, 进而影响锰离子掺杂格位和价态。本研究提出的反应步骤调控作为反应气氛、电荷补偿剂、反应温度三种调控方法外的一种新方法, 为Mn4+激活铝酸盐荧光粉中锰离子掺杂价态调控提供了新思路。 相似文献
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